Антинуклеарные антитела (ANA HEp-2, IFT)

Общая характеристика

Аутоиммунный гепатит (АИГ) – это хроническое заболевание печени неизвестной этиологии, которое может поражать любого пациента независимо от возраста, пола и этнической принадлежности. На начальном этапе клинический спектр заболевания значительно варьирует от бессимптомного течения до острой печеночной недостаточности с массивным некрозом гепатоцитов. (EASL Clinical Practice Guidelines on management of autoimmune hepatitis. Journal of Hepatology, August 2025, Vol. 83, Issue 2, Pages 453-501. (PMID: 40348684 / DOI: 10.1016/j2.7).

Ключевые диагностические акценты и изменение парадигмы по материалам EASL (Европейская ассоциация по изучению заболеваний печени) 2025: https://www.journal-of-hepatology.eu/article/S0168-8278(25)00173-4/fulltext
1. Аутоиммунную этиологию поражения печени нельзя исключать у мужчин, пациентов пожилого возраста или представителей разных этнических групп, если у них регистрируется невыясненный синдром цитолиза;
2. АИГ способен протекать как совершенно бессимптомно (случайная находка изолированного повышения АЛТ/АСТ при чек-апе), так и манифестировать в виде острого фульминантного (молниеносного) гепатита с массивным некрозом тканей, часто имитирующим острое токсическое или вирусное поражение печени;
3.Подтвержден статус косвенной реакции иммунофлуоресценции (IFT) как «золотого стандарта» для качественного определения скрининговых аутоантител (ANA, ASMA, LC-1, anti-LKM-1). Обычный уровень IgG в сыворотке крови не исключает диагноз АИГ. В педиатрической практике, а также во время фульминантного заболевания у взрослых уровень IgG может оставаться в пределах нормы. Именно поэтому первоочередное определение профиля аутоантитела методом IFT имеет критическое диагностическое значение.

Антинуклеарные антитела (ANA HEp-2, IFT).
ANA — это гетерогенная группа аутоантител, ошибочно атакующая собственные компоненты ядер и цитоплазмы клеток организма (нуклеиновые кислоты, гистоны, белки ядерной мембраны). Тест выполняется на специальной культуре человеческих клеток HEp-2, что позволяет врачу-лаборанту определить характерный тип свечения под микроскопом, а путем последовательных разведений сыворотки установить финальный титр (концентрацию) этих антител.
Клиническая (диагностическая) ценность по EASL 2025:
Первая линия скрининга: ANA остаются главным, наиболее чувствительным серологическим маркером для подтверждения аутоиммунной природы гепатита.

Клиническая (диагностическая) ценность по EASL 2025:
Первая линия скрининга: ANA остаются главным, наиболее чувствительным серологическим маркером для подтверждения аутоиммунной природы гепатита.
Важность метода (IFT на HEp-2): оценка титра и типа свечения (гомогенное, гранулярное) обязательна. В то же время, обычные тесты ИФА (ELISA) часто дают ложноотрицательные результаты на ранних стадиях.
Диагностический порог: Титр ≥1:80 -1:160 взрослых и ≥1:20 у детей является значительным диагностическим критерием, который включается в шкалу подсчета баллов АИГ.

«Согласно рекомендациям EASL и критериям IAIHG, выявление АNА титр ≥1:80 у взрослых (и ≥1:20 у детей) является весомым диагностическим маркером, который добавляет баллы к шкале верификации АИГ. Полученные результаты требуют обязательного сопоставления с гистологическим исследованием (биопсией печени), оценкой других аутоантител (ASMA, anti-LKM-1, anti-LC-1) и клинико-биохимической картиной».

Показания для назначения

1.Первичное обследование пациентов (независимо от возраста и пола) с невыясненным повышением АЛТ/АСТ (синдромом цитолиза), если исключены вирусные гепатиты;
2.Подозрение на острое/молниеносное начало гепатита, даже если уровень общего IgG в норме;
3.Дифференциальная диагностика при подозрении на перекрестные синдромы (например, АИГ + первичный билиарный холангит);
4.Наличие сопутствующих аутоиммунных заболеваний или отягощенного семейного анамнеза при наличии минимальных изменений лабораторных показателей печени;
5.Комплексная оценка состояния пациента перед планированием отмены иммуносупрессивной терапии (для прогнозирования риска рецидива АИГ);
6.Сочетание поражения печени с системными проявлениями (суставной синдром, кожная сыпь, длительная лихорадка невыясненного генеза, цитопении).

Маркер

Это маркер наличия аутоантител класса IgG к широкому спектру ядерных и цитоплазматических антигенов клетки человека (нуклеиновых кислот, гистонов, белков ядерной мембраны, ядрышек и митотического аппарата).

Органоспецифический маркер в гепатологии: является важным критерием для диагностики аутоиммунного гепатита (особенно при выявлении гомогенного паттерна или цитоплазматического филаментного свечения F-актина) и первичного билиарного холангита (ПБХ) (при выявлении митохондриального).

Главный скрининговый маркер системных заболеваний соединительной ткани (СЗСТ) — прежде всего системной красной волчанки (СКВ, где чувствительность метода достигает 95-99%), синдрома Шегрена, системной склеродермии (SSc) и смешанного заболевания соединительной ткани (МСТD).

Клиническая значимость

Состав показателей:

Антинуклеарні антитіла (ANA HEp-2, IFT)

<80 – отрицательный

80-160 -сомнительный

160–320 – умеренно
положительный (весомый порог 
для детей)

>320-высокоположительный

Правила подготовки

Правила доставки биоматериалов в лабораторию

Интерференция:

• Недавние вирусные инфекции: Вирусы (Эпштейн-Барра, ЦМВ, гепатиты B и C); вызывают поликлональную активацию В-лимфоцитов. Это может привести к появлению низких транзиторных титров ANA или ASMA, которые исчезнут после выздоровления.
  
  

• •Гемолиз;
  •Хилезная сыворотка (липемия);
  •Иктеричность (высокий билирубин);
  •Прием глюкокортикоидов и иммуносупрессантов: если пациент уже получает терапию (преднизолон, будесонид, азатиоприн), уровень аутоантител в крови быстро падает. Тесты могут показать ложноотрицательный результат или значительное понижение титра. Скрининг всегда лучше проводить до начала лечения.

Интерпретация:

• •Отрицательный результат (< 1:80)
  Значение титра: < 1:80 (инверсное разведение).
  Клиническая трактовка: Норма. Аутоиммунная патология на момент обследования маловероятна.
  Диагностическая значимость и тактика врача Нормальное состояние иммунной системы. При наличии ярких симптомов цитолиза рекомендуется исключить другие сероотрицательные формы или оценить динамику в течение определенного времени.
  • Незначительный уровень (1:80-1:160)
  Значение титра: 1:80-1:160 (инверсное разведение).
  Клиническая трактовка: Предельный уровень (порог положительности или серая зона), non-significant level.
  Диагностическая значимость и тактика врача: Может встречаться у 10-15% абсолютно здоровых пожилых людей или как временная реакция после вирусных инфекций. Самостоятельного диагностического значения нет.
  • Немного повышенный уровень (1:160 – 1:320)
  Значение титра: 1:160 – 1:320 (инверсное разведение).
  Клиническая трактовка: Умеренно положительный титр (весомый порог для детей).
  Диагностическая значимость и тактика врача Клинически значимый уровень. Согласно критериям EASL, титр ≥1:160 у взрослых (и ≥1:20 у детей) является официальным маркером, добавляющим баллы в шкалу диагностики АИГ. Требует сопоставления с биопсией и другими антителами (ASMA, LC-1).
  • Повышенный уровень (>1:320)
  Значение титра: > 1:320 (например: 1:640, 1:1280... инверсное разведение).
  Клиническая трактовка: Высокоположительный титр.
  Диагностическая значимость и тактика врача: Высокая вероятность системного аутоиммунного процесса. Свидетельствует о массивной активации В-лимфоцитов. Обязательно оценивается тип свечения ядра (гомогенное, гранулярное и т.п.) для дифференциации между АИГ и другими ревматологическими патологиями (СКВ, синдром Шегрена).

  
  Интерпретацией результата должен заниматься квалифицированный специалист, четко понимающий преимущества и ограничения теста в контексте всех клинико-анамнестических данных. Неправильное использование исследования может увеличить вероятность постановки ошибочного диагноза и привести к ненужным вмешательствам и снижению качества жизни пациента.