Комплекс №292 "Високочутливий скринінг раку шийки матки з імуноцитохімією p16, Ki-67, схвалений FDA"

Діагностичний напрямок

Онкологічні маркери та скринінги

Загальна характеристика

Котестування - це одна з стратегій скринігу раку шийки матки, визначена міднародними асоціаціями та Стандартом медичної допомоги «Скринінг раку шийки матки ведення пацієнток з аномальними результатами скринінгу та передраковими станами шийки матки» від 18 червня 2024 року № 1057, що складається з цитологічного дослідження шийки матки та ВПЛ тестування, що дозволяє найбільш повно оцінити стан шийки матки та спрогнозувати ризик розвику злоякісних новоутворень.
Для рутинного тестування таке дослідження може проводиться кожні 5 років у віці 25-65 років або частіше у випадку ведення попередніх аномальних результатів скринінгу.
Пап-тест методом рідинної цитології (технологія SurePath BD) - це сучасна та найбільш ефективна автоматизована методика, рекомендована FDA (США) та директивами СЕ, що у порівнянні з традиційною цитологією дає змогу:
•збільшити на 64,4% виявлення HSIL (дисплазій середнього та важкого ступенів ураження) та на 107 % рівень виявлення LSIL (дисплазій легкого ступеню)
•знизити на 58% кількість незадовільних цитологічних препаратів
•покращити на 75% диференціювання процесів запалення та слабко вираженої дисплазії (ASCUS)
З урахуванням оновлених рекомендацій скринінгу раку шийки матки цей метод володіє важливою особливістю - при одномоментному заборі біологічного матеріалу можливо провести 3 дослідження: власне Пап-тест, ВПЛ - тестування  та імуноцитохімічне дослідження.

Імуноцитохімія (ІЦХ) — ц е лабораторний метод якісного виявлення специфічних білків у цитологічних препаратах за допомогою реакції антиген-антитіло. У контексті скринінгу раку шийки матки набір CINtec PLUS Cytology Kit використовує коктейль первинних моноклональних антитіл для одночасного виявлення двох біомаркерів у клітинах епітелію шийки матки:
• p16INK4a: білок, що регулює клітинний цикл. Його надмірна експресія є сурогатним маркером трансформуючої інфекції вірусом папіломи людини (ВПЛ).
• Ki-67: маркер клітинної проліферації (поділу), який зазвичай відсутній у клітинах, що перебувають у стані спокою (G0).
Метод базується на ферментативному перетворенні хромогенів, що дозволяє візуально ідентифікувати білки під світловим мікроскопом:
• p16INK4a виявляється у вигляді коричневого осаду (хромоген DAB) у цитоплазмі та/або ядрі клітини.
• Ki-67 виявляється у вигляді червоного осаду (хромоген Fast Red) виключно в ядрі.
Система CINtec PLUS призначена для діагностики in vitro (IVD) та схвалена для використання як допоміжний засіб у скринінгу. Вона оптимізована для роботи на автоматизованих інструментах серії BenchMark IHC/ISH (GX, XT, ULTRA, ULTRA PLUS).

Імуноцитохімічне дослідження рекомендоване Recommendations for Use of p16/Ki67 Dual Stain for Management of Individuals Testing Positive for Human Papillomavirus MeganClarke, 2024  як допоміжний інструмент для тріажу (сортування) пацієнтів у таких клінічних ситуаціях:

1. Сортування ВПЛ-позитивних результатів
Це основне призначення тесту, схвалене FDA.
Його застосовують для визначення подальшої тактики у жінок, які мають позитивний результат ВПЛ високого ризику, отриманий під час:
• Первинного ВПЛ-скринінгу (коли ВПЛ-тест є першим етапом обстеження).
• Ко-тестування (одночасне проведення ПАП-тесту та ВПЛ-тесту).
• Ситуацій, коли обмежене генотипування ВПЛ (визначення типів 16 та 18) недоступне або не проводилося.
2. Сортування аномальних результатів ПАП-тесту
Імуноцитохімія використовується для уточнення ризику у пацієнток із сумнівними результатами традиційної цитології:
• ASC-US (клітини плоского епітелію невизначеного значення).
• LSIL (плоскоклітинне інтраепітеліальне ураження низького ступеня).
• Ситуації, коли ПАП-тест негативний (NILM), але ВПЛ-тест позитивний.
3.Подальше спостереження
Тест може бути застосований у процесі моніторингу пацієнток після:
• Отримання аномальних результатів попереднього скринінгу.
• Проведення кольпоскопії, якщо вона не виявила CIN2+.
• Проведеного лікування передракових станів шийки матки для оцінки його ефективності та ризику рецидиву.
Проте для останньої категорії немає достатньо даних щодо ефективності. 
4. Сценарії з урахуванням генотипу ВПЛ
Відповідно до настанов ASCCP та робочої групи Enduring Guidelines:
• Для ВПЛ 16/18:  Хоча імуноцитохімія може бути корисним, пацієнтки з цими типами часто підлягають негайній кольпоскопії незалежно від результату ІЦХ через їхній надвисокий онкогенний ризик.
• Для інших 12 типів ВПЛ високого ризику: Позитивний результат ІЦХ є прямою підставою для направлення на кольпоскопію, тоді як негативний результат дозволяє безпечно відкласти повторне обстеження на 1 рік.
ІЦХ р16Кі67 НЕ рекомендується:
• Як самостійний (первинний) скринінговий тест без попереднього ВПЛ-тесту або цитології.
• Для пацієнтів із негативним результатом на ВПЛ.
• У випадках, коли цитологія вже виявила серйозні зміни, такі як HSIL, ASC-H або AGC, оскільки вони потребують негайної кольпоскопії без додаткового сортування. 

Показання для призначення

Ведення аномальних результатів скринінгу раку шийки матки у пацієнток з позитивними результатами ВПЛ у наступних випадках під час спостереження після аномальних результатів скринінгу, кольпоскопії та лікування.

Маркер

Комплекс поєднує маркери цито-морфологічних змін в епітелії шийки матки, наявність високоонкогенних штамів ВПЛ-інфекції та визначення її активності.

Клінічна значущість

До складу комплексу входять:

• Пап-тест методом рідинної цитології (технологія SurePath BD)
• ВПЛ, 14 генотипів, схвалений FDA, з ідентифікацією 16, 18 типів – якісний
• Імуноцитохімія р16, Ki-67 (лише дозамовлення до Пап-тест рідинний/ВПЛ, 14 генотипів/Комплекс №277)

Правила підготовки

Правила доставки біоматеріалів до лабораторії